Отличные вторичные антитела, рекомендую! В нашей лаборатории мы применяли анти-мышиные и анти-кроличьи антитела, меченные пероксидазой хрена, для Вестерн-блоттинга (антитела детектировали с помошью набора Amersham ECL Prime Western Blotting Detection Reagent от «GE Healthcare»). Результаты оказались сопоставимы с теми, которые мы получали при использовании вторичных антител от «Sigma-Aldrich». Кроме того, мы успешно использовали флуоресцентно-меченные антитела (анти-кролик AF-488) для иммуноцитохимии. Существенным плюсом являются быстрая доставка и адекватная цена.

В нашем распоряжении были антитела против IgG кролика, полученные в козе, конъюгированные а) с AF488 и b) с пероксидазой хрена (HRP). Оба варианта нам очень понравились.

Антитела с AF488 отличались хорошим, ярким свечением, достаточно долго выдерживали сканирование на конфокальном микроскопе (10-12 оптических срезов, заключающая среда – Invitrogen, ProLong Gold). Отдельно хочется отметить отсутствие флюоресцентного «мусора» (точки по стеклу), что говорит о том, что антитела хорошо почищены и хорошего качества. Инкубировали в разведении 1:50 и 1:150 45 мин. При втором разведении результат лучше (меньше неспецифики и лучше разрешение сигналов). Сложилось впечатление, что и 1:200-1:250 вполне бы работали.

Антитела с пероксидазой также абсолютно нас устроили. Окрашивали 1ч 30 мин 1:2000, т.к. детекция диаминобензидином на home-made растворах. На ECL, скорее всего, нужно было бы разводить сильнее.

Для себя пока не выяснили вопрос стабильности при долгосрочном хранении в замороженном виде и при +4, т.к. в лаборатории они у нас недавно.

Планируем, если будет налажен серийный выпуск, переходить на эти антитела, т.к. наличие производителя в одном городе с нами делает логистику очень удобной, а качество нас вполне устраивает.